Kingfisher生物技術有限公司致力于加快獸醫基礎研究，開發和商業化了之前市場未曾涉及的多個物種的研究試劑。我們的主要重點是開發牛、馬、豬和雞的獸醫研究用高品質試劑，此外，我們也提供包括犬、貓、山羊、綿羊、火雞、水牛、鯰魚、鮭魚等其他動物和魚類研究領域用試劑。我們公司位于明尼蘇達州圣保羅市，我們與大學和企業實驗室建立了合作研究中心，位于明尼蘇達大學的明尼阿波利斯和圣保羅校區間，上海普邁生物新近被授權代理Kingfisher產品，將與Kingfisher公司攜手開拓中國市場公司必將成為生物技術領域的*,也將Kingfisher公司的理念貫徹到底，打造生物技術新概念，Kingfisher主要產品有以下幾個方面：
    重組蛋白：   干擾素、白介素、巨噬細胞移動抑制因子等
    多克隆抗體： 抗CCL2、抗IL、抗CXCL9等多抗
    ELISA試劑盒：牛CCL2、牛IL-13、犬和馬IL-1 beta、雞IL-16等ELISA 試劑盒

種屬 Species
        Bovine   牛   重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Canine   犬   重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Chicken  雞  重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Equine   馬   重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Feline    貓   重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Rabbit   兔   重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Swine    豬   重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒
        Turkey  火雞重組蛋白、多抗、ELISA試劑盒

蛋白質常見問題

什么是載體蛋白？

載體蛋白是在重構期間添加到凍干的重組蛋白中的另外的蛋白質，以在儲存，冷凍和使用期間增加稀釋的重組蛋白的穩定性。

什么是重組蛋白重建的可接受的載體蛋白？

牛血清白蛋白（BSA）是用于重組蛋白重建的常見的載體蛋白。但是，如果使用牛重組蛋白，請使用非牛載體蛋白，如馬血清白蛋白（ESA）。 

如果使用重組蛋白進行體外細胞培養刺激，通常可以在含有血清或其他可接受的載體蛋白而不是BSA / ESA溶液的完整細胞培養基中直接重構重組蛋白。

重構需要多少濃度的載體蛋白？

在終溶液中載體蛋白的濃度應至少為0.1％。如果需要，可以使用另外的載體蛋白。通常，在1X PBS中的0.1-10％BSA溶液是可接受的重構溶液。

重組蛋白重建的可接受體積是多少？

通常，對于我們的5μg和25μg重組蛋白質小瓶，100μL是可接受的重建體積。我們的5μg和25μg樣品瓶的大體積為500μL。 

通常，1 mL是我們100μg小瓶重組蛋白的可接受的重建體積。我們的100μg樣品瓶的大體積為2 mL。

重組時重組蛋白的濃度是多少？

重組蛋白的濃度取決于重建體積。例如，如果在100μL載體蛋白溶液中重構5μg重組蛋白，則濃度為5μg/100μL或50μg/ mL。 

重組蛋白的生物活性是什么？

重組蛋白的生物活性列于數據表。如果數據表中未列出生物活性，我們正在測試重組蛋白的生物活性。物種特異性生物測定通常不適用于我們的大多數蛋白質。因此，需要開發這些生物測定法。我們選擇在此測試期間提供重組蛋白。 

重組蛋白的生物活性單位是多少？

我們僅以質量單位（即μg）報告我們的重組蛋白生物活性，而不是以生物活性單位（即單位）。生物活性單位是在特定條件下在特定測定中產生特定生物活性測量所需的產物量。生物活性單位依賴于蛋白質和化驗。另外，通常僅人類重組蛋白質具有與生物活性單位相關的這些特異性生物測定法。生物活性測量單位通常沒有明確規定非人類物種。鑒于生物測定通常產生高度可變的結果，生物活性單位的確定也是高度可變的。然而，質量不是可變的，因此它提供了更準確的測量。從而，

酵母作為表達系統有什么優勢，它與大腸桿菌表達系統相比如何？

酵母作為表達系統具有幾個優點，并且由酵母產生的重組蛋白具有幾個特征，使得它們成為包括細胞培養在內的許多應用的理想選擇。Kingfisher Biotech使用的酵母表達系統將重組蛋白分泌到培養基中。這種分泌通常被認為是純化過程的步，因為酵母細胞固有地分泌很少的天然蛋白質。酵母分泌的重組蛋白質通過高爾基體處理，因此它們可以進行翻譯后修飾。這些修飾可包括糖基化，磷酸化和硫酸化。有許多蛋白質需要修改蛋白質功能，正確折疊或溶解度。酵母表達系統的另一個好處是酵母沒有像E這樣的細菌細胞壁。大腸桿菌，因此不存在內毒素（脂多糖）。酵母天然無內毒素。

大腸桿菌表達的重組蛋白不含有翻譯后修飾（大腸桿菌不含高爾基體）。在大腸桿菌中制備的重組蛋白通常定位于包涵體。從這些包涵體中純化可能需要苛刻的條件來釋放重組蛋白，然后進行隨后的重折疊過程。這些苛刻的治療可以影響蛋白質的功能。

ELISA常見問題解答

你有自己動手的ELISAs技術指南嗎？

是的，我們這樣做。這是鏈接--ELISA技術指南

使用自己動手ELISA可以進行多少次檢測？

自己動手的ELISA試劑盒是獨立的非結合抗體（捕獲抗體），重組蛋白（標準）和生物素化抗體（檢測抗體）。如果需要（或組件用完），可以單獨購買這些組件中的每一個。已顯示這些抗體與ELISA中提供的標準一起起作用。評估各個組件的數據表將提供代表性的工作濃度，以幫助確定可以執行的分析的數量。通常，捕獲抗體是限制性試劑。

例如，豬IFNα1自己做的ELISA（DYI0724S-003）包括：
 

100μg抗豬IFNα1多克隆抗體（PB0445S-100）：

ELISA中該試劑的推薦滴度為1-5μg/ ml。如果在96孔板中每孔100μl涂覆，則需要大約10ml試劑涂覆96孔板。因此，根據使用的滴度，每板需要10μg-50μg。這意味著所提供的試劑應涂覆2-10個板。
 

5μg重組豬IFNα1（RP0010S-005）：

*標準濃度需要由用戶確定。如果使用50 ng / ml（0.05μg/ ml）的高標準濃度，假設每個平板需要0.5 ml標準品，這應該為200次分析提供足夠的標準。
 

50μgBiotinylatedAnti-SwineIFNα1多克隆抗體（PBB0451??S-050）：

ELISA中該試劑的推薦滴度為0.1-0.5μg/ ml。如果檢測到 

在96孔板中每孔100μl，這將需要大約10ml試劑來檢測96孔板。因此，取決于所用的滴度，每個ELISA需要1-5μg。這意味著所提供的試劑應在10-50次檢測中檢測。

因此，取決于優化結果，能夠用所提供的組件執行的ELISA的數量可能存在相當大的差異。如前所述，這些組件中的每一個都可以單獨購買。有可能的是，捕獲抗體需要單獨購買，因為該試劑將在其他組分（它通常是限制性試劑）之前首先被耗盡。

我們可以在ELISAs中使用其他樣本類型，如血清或血漿嗎？

我們的許多客戶使用我們的ELISAs進行血清，血漿或其他樣品類型檢測。為了使用不同的樣品類型，需要在測定中驗證標準品和樣品稀釋劑。*稀釋劑應提供線性結果（即當稀釋樣品時，在校正稀釋因子時獲得相似的值）并且具有80-120％的回收率（即，如果將已知量的標準物添加到樣品類型中，80-添加的120％應在測定中測量。

為了驗證樣品稀釋劑是否與所需的樣品類型一起工作，需要進行線性和回收分析。該測定法易于實施。只需使用您的測試樣品稀釋劑準備正常的標準曲線。將已知量的標準品加入/加入測試樣品中。向測試樣品稀釋劑添加/加入相同數量的標準品（這是100％回收率）。確保在測定中運行非標準加標測試樣品，以從測試樣品中減去任何背景值。準備稀釋劑標準加標樣品，測試標準加標樣品和非標準加標樣品與測試稀釋劑（即1：2,1：4,1：8,1：16,1）的多個連續稀釋液：32等）。當標準加標樣品值（減去非標準加標樣品背景）為稀釋劑標準加標樣品結果的80-120％時，*回收率。此外，當校正稀釋（線性）時，結果應給出類似的值。 

通常，在DPBS（試劑稀釋劑）中用4％BSA進行1：4至1：8稀釋足以實現樣品的線性并獲得*回收率。如果在DPBS中用4％BSA不能獲得*結果，則需要使用更高的樣品稀釋液或不同的樣品稀釋劑。要嘗試的其他稀釋劑是DPBS中10-50％的血清（例如胎牛血清或馬血清）（只要血清不含可能與ELISA交叉反應的目的蛋白質）。另外，增加DPBS緩沖液中的BSA含量也可以增加線性和恢復。

 產品列表如下：

Bovine IL-5 Primer Set