貨號：003760

品名：sliceGolgi Kit （sliceGolgi試劑盒）

產品特點：

在自由浮動切片/切片上進行高爾基染色 

Bioenno  也在銷售sliceGolgi  試劑盒，并增加  了  固色劑 套裝。該  sliceGolgi 套件的設計上運行的片/段高爾基染色。浸漬和染色可以在自由浮動部分（50?400微米厚度）上進行。額外的   固色劑套裝使用Bioenno的醛來處理額外的樣品。  

該試劑盒已經在來自大鼠和小鼠的許多類型的腦切片中進行了廣泛的測試，它們是：

• 新鮮切片，例如使用組織切碎機快速制備的急性切片。

• 器官切片培養(yǎng)物，  例如培養(yǎng)的海馬切片和培養(yǎng)的皮層切片。

• 已經完成電生理記錄和/或藥物施用的人造腦脊液（ACSF） - 切片。

• 用Bioenno醛  固定劑（產品目錄號：003780）通過灌注或浸泡固定大腦的切片。固定的大腦可以在室溫（RT，15至25攝氏度）下在50?400微米處系統(tǒng)切片，并且切片可以單獨進行高爾基染色，單獨的免疫組織化學/免疫細胞化學（ICC）或組合的高爾基染色和ICC 。

• 額外的固色劑 套件允許處理更多的樣品。Bioenno建議購買固定試劑盒的sliceGolgi試劑盒。

所述  sliceGolgi套件 可以被施加到視網(wǎng)膜，脊髓，和培養(yǎng)的細胞以染色神經元過程。

所述sliceGolgi套件產生樹突和棘（參見圖）的兩個可靠和高質量的標記。神經元浸漬在50至200微米厚的切片中  超快，僅在某些情況下2-3天。一般來說，浸漬時間取決于部件的年齡和厚度，需要4-7天。該試劑盒可儲存在15-25ºC的黑暗環(huán)境中長達12個月。

高爾基染色和免疫組化/免疫細胞化學（ICC）  

Bioenno Tech已經成功地將sliceGolgi試劑盒與ICC一起用于同一腦部分（見圖4-9）。為了執(zhí)行組合的高爾基染色和ICC，固定切片首先經歷高爾基染色，然后進行ICC：

（1）組織處理：將  動物心臟灌注生理鹽水，然后灌注由Bioenno Tech開發(fā)的  固定劑 （目錄號：003780）。將大腦從顱骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome或類似類型的切片機/顯微鏡在RT下將腦部切成50?100微米厚。切片以0.1M PB（pH 7.4）收集并可以在緩沖液中儲存長達一周（4℃）。

固定切片可用于單獨的高爾基染色，單獨的ICC，以及組合的高爾基染色和ICC。

（2）  高爾基染色：  在RT（15-25℃）使用sliceGolgi試劑盒 對自由浮動切片進行高爾基染色  。神經元的浸潤可能需要2-5天。

（3）  ICC：  自由浮動部分可以采用標準的抗生物素蛋白 - 生物素復合物（ABC）方法。通過在含有H 2 O 2的3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）中孵育切片可以使免疫反應產物可視化。

注：  該  sliceGolgi套件 不適用于冷凍組織工作。切割前固定的組織塊不能冷凍。

產品功能

• 適用于切片/切片組織（厚度為50至400微米）
• 對自由浮動部分進行浸漬和染色
• 新型醛  固定劑 和增強浸漬液
• 神經元的浸潤很快（2-7天）
• 結合高爾基體染色和免疫組織化學
• 經過驗證的結果/用戶友好
• 足夠多達  1000個腦區(qū) （50-400微米厚，尺寸約1×1.5厘米）
• 用于體外實驗室使用
• 專門的
• 12個月保修

使用sliceGolgi試劑盒證明的結果 （產品目錄號：003760）

• 經過驗證的結果使用sliceGolgi套件 

樹枝狀分支和刺已經可靠地浸漬并用切片凝膠試劑盒染色。 

圖1 - 額皮質層II中浸漬并染色的神經元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬和染色神經元中一日齡12（P12）C57BL小鼠的額皮質。200微米厚的切片中的神經元的樹突棘（箭頭）標記良好。箭頭表示絲狀偽足突起，未成熟的刺。圖像是使用20x物鏡拍攝的。

圖2 - 新皮層第三層錐體神經元的樹枝狀分支

使用sliceGolgi試劑盒 浸漬和染色位于20×物鏡的額頂皮質運動區(qū)域的錐體神經元的斜樹突和主枝（莖）。C57BL小鼠12天齡。

圖3 - 下丘腦外側的神經元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬自由浮動的條件下在100微米厚的切片的神經元。從P12 C57BL小鼠的外側下丘腦區(qū)域采集具有軸突終端的染色的神經元（20x物鏡）。在樹枝狀分支上發(fā)現(xiàn)許多絲狀偽足樣突起（箭頭）。

圖4 - 聯(lián)合使用sliceGolgi試劑盒和免疫組織化學/免疫細胞化學（ICC）

高爾基染色和ICC的組合允許同時觀察樹突棘和免疫反應產物。通常，自由浮動部分首先被處理用于高爾基染色，然后用于ICC。對于高爾基染色，通過升主動脈用0.9％鹽水溶液灌注動物，然后用新制備的固定劑（目錄號：003780，Bioenno Tech）灌注。將腦從顱骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome以50-100μm厚度切割腦，并將切片收集到0.1M PB（pH 7.4）中的組織培養(yǎng)孔中。該sliceGolgi套件（目錄號：003760）浸漬（2-5天，RT）并染色樹突（黑色）。為了執(zhí)行ICC，將自由浮動切片進行標準的抗生物素蛋白 - 生物素復合物（ABC）方法。通過將切片在含有0.01％H 2 O 2的 0.04％3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）中溫育8-10分鐘來使免疫反應產物可視化。使用4x物鏡從2個月大的C57小鼠的海馬中取得圖像。

圖5 - 在同一腦切片上進行的高爾基染色和ICC

結合的高爾基染色和ICC：1）C57小鼠心臟灌注生理鹽水，然后用Bioenno開發(fā)的醛固定劑 （目錄號：003780）。2）使用sliceGolgi試劑盒對自由浮動切片（50微米）進行高爾基染色。浸漬時間僅在22±1℃時為2天。3）使用標準的抗生物素蛋白 - 生物素復合物方法處理小白蛋白（PV）的ICC。單克隆小鼠抗PV抗體（1：20,000，MAB1572，Chemicon）的溫育時間在22±1℃過夜。使用4x物鏡從丘腦攝取圖像。

圖6。- 樹枝狀分支和PV-免疫陽性神經元

高爾基染色和ICC在相同的腦部分進行。使用sliceGolgi試劑盒在自由浮動部分（100μm）上進行高爾基染色。浸漬時間為22±1℃3天。從4個月大的C57小鼠的下臂拍攝圖像（63倍物鏡）。

圖7 - 高爾基染色的樹突和免疫標記的神經元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色皮層神經元的樹枝狀分支在皮層的層III。免疫反應性神經元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。從4個月大的C57小鼠拍攝圖像（63倍物鏡）。

圖8 - 高爾基染色的皮層神經元和免疫標記的神經元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色神經元的樹枝狀分支在皮質的更深的層。僅在22±1℃時，100μm厚切片中神經元的浸潤需要2天。免疫反應性神經元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。該圖像是使用20x物鏡從2個月大的C57小鼠拍攝的。

圖9 - 在相同的腦切片上進行高爾基染色和ICC

該sliceGolgi套件來標記樹突分支。以20x物鏡顯示的頂部面板中的盒裝區(qū)域被放大（63x）以突出樹突棘（箭頭）和免疫標記的神經元（箭頭）。這些圖像取自2月齡C57BL小鼠的額頂皮層（體感區(qū)域）。

產品信息：

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Bioenno Lifesciences 是Bioenno Tech，LLC的生物醫(yī)學子公司。自2011年以來，我們一直為神經科學研究提供醫(yī)學界業(yè)界的醫(yī)療試劑盒，包括高爾基試劑盒，免疫組織化學基質試劑盒以及染色溶液和組織學試劑盒。多年來，我們 一直在積極研究新技術，這些新技術不斷轉變?yōu)楦咝阅墚a品和/或升級我們的在線產品。

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